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紫外/可見分光光度計的測定方法

  • 更新時間2019-10-23
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(一)定量分析
一、法
基于朗伯-比爾定律A= εbC,當某-物質在一 一定波長下e (吸收系數,可由已知濃度樣品通過測量、計算求得)為-常數,比色皿的光程也是已知,也是一個常數,只要在吸收系數的波長處測定樣品溶液的吸光度值(D值),然后由下式求得該樣品溶液的濃度或含量:
C=A/εb
二、標準對照法
在同樣條件下,在選定的波長處,分別測定已知濃度標準溶液的吸光度值A標和樣品溶液的吸光度值A樣,然后由下式求得樣品溶液的濃度或含量:
C樣= A樣+ AgxC標
三、標準曲線法(包括K因數法)
常用的定量分析方法。即在一定波長(λ ma)下測定某max物質的標準系列溶液的吸光度作校正曲線,然后測定樣品溶液的吸光度值,由校正曲線求得樣品溶液的濃度或含量。
所配置的標準系列溶液的吸光度應在0.1~1.bs范圍內,吸收測定的精密度可達0.5%。
注意: UV/Vis的低檢測濃度與吸收系數、儀器噪聲、基線平直度、光譜帶寬有關。而檢測濃度則與吸收系數、儀器的雜散光、光譜帶寬等有關,吸收系數與光譜帶寬有關。
雜散光越小,檢測上限越高。